一招变身检测荧光达人

时间:2014-01-08来源:网络

  让我们再来看一个激发块的光谱图:

上图为olympus U-FGW激发块的光谱信息,可以看出此激发块可以提供的激发光在530-560nm左右,允许透过的荧光光谱范围在570nm以上,所以此激发块并不适合DAPI激发。如果用此激发块来做DAPI的观察,就会出现看不到荧光的现象。

  可见,要选择合适的荧光激发块,我们首先要知道荧光染料激发和发射光的波长特性和激发块光谱的各项数据。但是,荧光染料和滤色片的种类非常多,用户往往没有渠道来获取这些信息。在实际实验中使用荧光显微镜时,因为荧光激发块配置错误而得不到好的观察效果的现象经常发生,对于用户来说是一件非常烦恼的事。

  为了方便用户正确选择激发和发射波长,节省时间,日本理化研究所脑科学所-奥林巴斯合作中心(the RIKEN BSI-Olympus Collaboration Center : http://rikenbocc.brain.riken.jp/index_e.html)开发了软件Spectrum Manager。用户选择荧光染料,软件会给出染料的光谱信息和推荐的滤色片选择等信息,使用非常方便。

  还可利用Data Manager自行对光源信息、染料数据库或滤色片信息进行更新。

  此款软件已经整合至奥林巴斯共聚焦显微镜的一款软件中,发布以来得到了用户非常好的反响。因此,现将该软件开放给所有显微镜使用者,供大家免费使用。

  下载地址:http://cn.olympus.com/smkx_second/second.aspx?nodeid=187page=ContentPagecontentid=1011

  由于是针对共聚焦显微镜的软件,所以软件中仅提供了激光光源谱线。如果您有需要,也可以将汞灯和氙灯光源信息导入至软件。

  以下提供普通荧光显微镜常用的汞灯和氙灯光源的图谱,供大家参考。

  汞灯在313, 334, 365, 406, 435, 546, and 578nm有比较好的激发峰。

  氙灯在可见光光谱范围内强度更稳定(没有像汞灯那样的光谱峰值),在红外波段比汞灯强度高。但在紫外波段有一定的缺陷性。

  所以选择光源时,光源特性要与我们的具体应用相匹配。

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关键词: 检测荧光 发射波长 荧光酶标仪

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